第三节 蓄积毒性实验

一、目的

蓄积毒性实验是评价外源化学物有无蓄积毒性的重要方法。

本实验的目的是了解蓄积毒性实验的原理，掌握蓄积系数法。

二、原理

某些毒物多次以小剂量反复进入体内，可表现出机体对该毒物的反应性增强，即一次染毒不引起反应的剂量，如多次重复染毒，则可能引起明显的反应甚至死亡。这表明毒物有蓄积毒性。毒物的蓄积与进入机体的毒物剂量、重复染毒间隔时间、毒物的毒性及其代谢特点和机体反应特性条件有关。

三、试剂和材料

（1）实验动物：健康成年大鼠或小鼠。

（2）器材：注射器、灌胃针、动物体重秤。

四、实验方法

采用蓄积系数法：选用大鼠或小鼠以经口灌胃或腹腔注射方法进行实验，先进行受试物的急性毒性实验，求出LD50。然后选取相同条件的动物40只（或更多），随机分为实验和对照2组，每组至少20只，雌雄各半。在1/20～1/5LD50范围内选择剂量，以相同染毒途径、定时、定量对实验组染毒。观察记录动物死亡数。当实验组累积发生一半动物死亡时终止染毒。累计自实验开始到出现50%动物死亡时的累积染毒总剂量（∑LD50[n]），用公式1计算该毒物的蓄积系数K值：

蓄积系数K=∑LD50[n]/∑LD50[1]（公式1）

式中

∑LD50[1]：一次染毒的50%的致死剂量；

∑LD50[n]：引起动物死亡的累计总剂量。

根据蓄积系数值，可将毒物的蓄积作用分4级（表2-12）。

另外一种测定毒物蓄积系数的实验方法是：动物每天按体重给一定剂量的毒物染毒。第1～4天，给0.1∑LDs。剂量，然后染毒剂量按1.5倍每4天递增一次，染毒剂量安排见表2-13。

表2-12 按蓄积系数对蓄积作用分级

表2-13 蓄积实验染毒方案

蓄积系数的计算仍用公式1，评价的标准仍按表2-12。